NABİLAH ABD ALEEM SİDEK, ADYANİ AZİZAH ABD HALİM, SAAD TAYYAB
Türk Biyokimya Dergisi - 2010;35(1):45-49
Amaç: 9 M üre ve 6 M guanidin hidroklorür ile denature olan fisinin denatürasyon evrelerini karşılaştırmaktır. Az sayıda protein bu maddelerle denatüre olduğu zaman farklı açılma evreleri sergiler. Metod: Fisinin doğal ve farklı denatürasyon evrelerini tanımlamak için içsel floresans, triptofan floresansı, uzak-UV spektral sinyali ve enzim aktivitesi kullanıldı. Bulgular: İçsel ve triptofan floresansı bulgularına göre farklı denatürasyon evreleri oluşmuştur. Her iki evre floresans yoğunluk değişiminin büyüklüğü ve kırmızı kaymanın derecesi bakımından farklıydı. Sırasıyla içsel ve triptofan floresansı kullanılarak guanidin hidroklorür ile emisyon maksimumunda 12 ve 17 nm, üre ile 3 ve10 nm kırmızıya kayma gözlenmiştir. UV absorpsiyon spektrumunlarında hipokromizmin büyüklüğü ve uzak kırmızı kayma farkları anlamlıydı. Enzim aktivitesinde guanidin hidroklorür %65, üre ise tam kayba yol açtı. Sonuç: üre ve guanidine hidroklorürün fisinde ortaya çıkardığı denatürasyon evresi anlamlı derecede farklıdır ve guanidin hidroklorür üreden daha etkilidir. Bu sonuçlar fisinin yapı aktivite ilişkisini tesbitte yararlı olabilir.
