AHMET CUMAOĞLU, ASLI ÖZGE AĞKAYA, ZEHRA ÖZKUL
Turkish Journal of Pharmaceutical Sciences - 2019;16(1):54-61
Amaç: Lipit peroksidasyonu ürünü aldehit, 4-hidroinonenal (HNE), nörodejeneratif hastalıklar ve yaşlanma gibi oksidatif strese bağlı inflamatuvar patolojilerle ilişkilendirilmiştir. Bu bağlamda, HNE’nin nöroinflamatuvar cevap üzerine etkisini siklooksijenaz-2 (COX-2), indüklenebilir nitrik oksit sentaz (iNOS) ifadelenmeleri ve sitokin üretimi üzerinden incelenmiştir. Bunlara ek olarak, nükleer faktör eritroid 2ilişkili faktör 2 (Nrf2)/ Kelch-benzeri ECH-ilişkili protein 1 (Keap1) sinyal proteinleri, antioksidan enzimler hemoksijenaz-1 (HO-1) ve nikotinamid adenin dinükleotit fosfat dehidrojenaz, kinon 1 (NQO1) ifadelenme düzeyleri ölçüldü ve sonuçlar kersetin ve monokloropivaloilkersetin uygulanan hücrelerle karşılaştırılmıştır. Gereç ve Yöntemler: Sitotoksisite MTT (3-(4, 5-dimetiltiyazol-2-yl)-2, 5-difeniltetrazolyum bromit) indirgenme yöntemi ile ölçüldü ve sitokin üretimi ise sitokin array ile belirlendi. Bununla birlikte, 2, 5 μM HNE uygulanmış BV-2 hücrelerinde hücre içi Nrf2/Keap1 sinyal proteinleri, HO-1, NQO1 ve COX-2 ifadeleri Western blot ile analiz edildi. iNOS ve COX-2 mRNA düzeyleri ters transkripsiyon-kantitatif polimeraz zincir reaksiyonu ile ölçülmüştür. Bulgular: HNE mikroglial hücrelerde COX-2 mRNA ve protein düzeylerini, iNOS mRNA düzeylerini ve bunlarla birlikte sitokin üretimini artırdı. Buna ek olarak, HNE uygulaması Keap1 düzeyinde belirgin bir artışla birlikte, sitoplazmik Nrf2 ifadeleri ve antioksidan enzim HO-1 düzeylerini azaltmıştır. Kersetin ve monokloropivaloilkersetin ile tedavi COX-2 mRNA ifadelenme düzeylerini azaltarak nöroinflamasyonu hafifletmiştir. Monokloropivaloilkersetin sitoplazmik Keap1 seviyelerini azaltırken Nrf2’nin nükleer translokasyonunu artırmıştır, bu durum HO-1 ve NQO1 ifadelenmelerini uyarımı ile sonuçlanmıştır. Sonuç: Bu sonuçlar BV-2 mikroglial hücrelerde HNE’nin oksitatif stres ve inflamasyon arasında bağlayıcı olabileceğini göstermektedir. Özellikle monokloropivaloilkersetin, proinflamatuvar genlerin ifadelenme düzeylerini azaltıp, antioksidan savunma sistemini güçlendirerek inflamasyonu hafifletmiştir.
