MARYA VAKIL NASLIYAN, SİDAR BEREKETOĞLU, ÖZLEM YILDIRIM
Turkish Journal of Pharmaceutical Sciences - 2019;16(2):206-210
Amaç: Enzim izolasyonu ve enzimler üzerinde yapılan deneyler, büyük çaba, maliyet ve zaman gerektirir. Bu yüzden, enzimlerin kullanılabilirliğinin immobilizasyon ile uzatılması önemlidir. Bu çalışmadaki amacımız, aldoz redüktaz (AR) enzimini immobilize etmek ve serbest AR’ninkiler ile karşılaştırarak immobilize AR’nin deney şartlarını optimize etmektir. Gereç ve Yöntemler: AR, sığır karaciğer ve böbreğinden izole edildi ve gluteraldehid ile fotografik jelatine çapraz bağlanarak immobilize edildi. Daha sonra, enzim aktivitesi belirlenerek serbest ve immobilize AR’nin optimum pH, sıcaklık ve depolama koşulları tespit edildi. Bulgular: Serbest AR için pH 7.0 ve 60°C olan optimum pH ve sıcaklık seviyeleri, immobilizasyondan sonra pH 7.5 ve 50°C olarak belirlendi. İmmobilize AR’nin enzim aktivitesinin, 15 kez kullanımdan sonra %65 oranında korunduğu tespit edildi. Bununla birlikte, +4°C’de 20 gün boyunca saklanan serbest AR’nin aktivitesi %85 oranında korunurken immobilize AR’nin aktivitesinin %95 oranında korunduğu bulunmuştur. Sonuç: Deneylerimiz, immobilizasyonu takiben enzim aktivitesini etkileyen koşulların değişebileceğini göstermektedir. Ayrıca, immobilize AR, serbest AR’ye göre daha yüksek aktiviteyle korunup tekrar tekrar kullanılabilmektedir.
